PEMERIKSAAN SERUM GLUTAMIC PYRUVIC TRANSAMINASE (SGPT) KIMIA KLINIK

Nama               : Ainan Dwi Lestari

NIM                : PO.71.3.203.17.1.003

Prodi               : D-III Teknologi Laboratorium Medis

Dosen              : dr. Riska Anton, Sp.PK.

PEMERIKSAAN SERUM GLUTAMIC PYRUVIC TRANSAMINASE (SGPT)/ AMINOTRANSFERASE ALANIN (ALT)

Aminotransferase alanin (ALT)/ SGPT merupakan enzim yanng utama banyak di temukan pasa sel hati serta efektif dalam mendiagnosis destruksi hepatoselular. Enzim ini juga di temukan dalam jumlah sedikit pada otot jantung, ginjal, serta otot rangka. Kadar ALT serum dapat lebih tinggi dari kadar sekelompok transferase lainnya (transaminase), aminotransferase aspartat (aspartate aminotransferse, AST)/ serum glutamic oxatoacetic transaminase (SGOT), dalam kasus hepatitis akut serta serta kerusakan hati akibat penggunaan obat dan zat kimia, dengan setiap serum mencapai 200-4000 U/l. ALT digunakan untuk membedakan antara penyebab karena kerusakan hati dan ikterik hemolitik. Meninjau ikterik, kadar ALT serum yang berasal dari hati, temuannya bernilai lebih tinggi dari 300 unit; yang berasal dari bukan hati, temuan bernilai.

Metode

Kinetik UV

Prinsip

L – alanine + a – Keoglutarat + L – alanin     → L - Glutamat + piruvat

Piruvat + NADH + H⁺                                    → L – laktat + NAD⁺

Piruvat yang dihasilkan tersebut sebanding dengan oksidasi dari NADH menjadi NAD. Reaksi tersebut menggambarkan aktifitas ALT dan diukur secara fotometrik.

Alat dan Bahan

·                Alat :

Tabung reaksi

Rak tabung

Spektrofotometer

Centrifuge

Mikropipet

Tips biru dan kuning

·                Bahan :

Reagen SGPT

Serum

Aquadest

Cara Kerja

·                Persiapan reagen kerja :

Buffer/ reagen 1	Substrat/ reagen 2
2000 μl	500 μl

1.             Campur reagen buffer dan substrat dengan perbandingan 4 : 1.

2.             Volume reagen di sesuaikan dengan kebutuhan.

·                Pemeriksaan :

	Pipet ke dalam tabung
Reagen kerja Serum	500 μl 50 μl

1.             Sebelum ditambahkan serum, reagen kerja di inkubasi terlebih dahulu selama 10 menit pada suhu 37°C

2.             Serum ditambahkan ke dalam reagen kerja pada saat pembacaan pada photometer.

3.             Baca pada fotometer dengan panjang gelombang 546 nm.

Faktor

1746

Nilai Rujukan

Dewasa           : 10-35 U/L : 4-36 U/L pada suhu 37°C (Satuan SI).

Laki-laki         : sampai 42 U/L

Wanita             : sampai 32 U/L

Anak               : sama dengan dewasa

Bayi                 : temuan bisa dua kali lipat setinggi dewasa

Usia lanjut       : sedikit lebih tinggi dari dewasa.

PEMERIKSAAN GAMMA-GLUTAMIL TRANSFERASE (GGT) KIMIA KLINIK

Nama               : Ainan Dwi Lestari

NIM                : PO.71.3.203.17.1.003

Prodi               : D-III Teknologi Laboratorium Medis

Dosen              : dr. Riska Anton, Sp.PK.

PEMERIKSAAN GAMMA-GLUTAMIL TRANSFERASE (GGT)

Enzim gamma-glutamil transferase (GGT) ditemukan terutama dalam hati dan ginjal, sementara kuantitas yang lebih rendah ditemukan dalam limpa, kelenjar prostat dan otot jantung. GGT merupakan uji yang sensitif untum mendeteksi beragam jenis penyakit parenkim hepar (hati). Kadarnya dalam serum akan meningkat lebih awal dan akan tetap meningkat selama kerusankan sel tetap berlangsung. Enzim ini bekerja dengan memindahkan suatu gugus gamma-glutamil dari suatu peptide atau senyawa lain yang mengandung gugus ini, ke suatu molekul lain yang menerima (akseptor).

Kadar tinggi GGT terjadi setelah 12 sampai 24 jam bagi orang yang minum alkohol dalm jumlah banyak, dan mungkin akan tetap meningkat selama 2 sampai 3 minggu setelah asupan alkohol dihentikan. Beberapa program rehabilitasi pencandu alkohol menggunakan kadar GGT sebagai arahan saat merencakan asuhan dikarenakan bagi pecandu alkohol. Uji GGT dipandang lebih sensitif untuk menentukan disfungsi hati daripada uji alkalin fosfatase.

Metode

Kinetik Soluble subtrate, modifikasi Szasz

Prinsip

·                L-ɣ-Glutamyl-3-Carbozy-4-Nitroanilide + Glycylglycine ^(Ɣ-GT)

L-ɣ-Glutamylglycylglycine + 5-amino-2-Nitrobenzoate

·                Nilai 5-Amino-2-Nitrobenzoate yang terbentuk sebanding dengan aktivitas ɣ-GT dalam serum bila diukur pada 405 nm dengan reaksi kinetik.

Alat dan Bahan

·                Alat :

Kuvet

Pipet 1,0 Ml

Mikropipet 50µl

Pemanas 30oc / 37oc

Photometer Λ 405 (400-420)

Yellow dan blue tip

Centrifuge

Tissue

·                Bahan :

Reagen kerja

Serum

Cara Kerja

·                Pembuatan larutan kerja :

1.             Larutkan reagensia dengan pelarut aquabidest sesuai volume pada label botol dan campur dengan baik.

2.             Larutan ini stabil selama 21 hari pada suhu 2-8°C dan 3 hari pada suhu kamar (18-30°C).

3.             Absorbance larutan blanko reagensia harus <0,85 bila dibaca terhadap aquabidest pada panjang gelombang 405 (400-420) nm.

·                Bahan pemeriksaan :

Spesimen terbaik adalah serum (dari darah yang tidak hemolisis). ɣ-GT dalam serum stabil selama 7 hari pada suhu 2-25°C dan 1 tahun pada suhu -20°C.

Masukkan ke dalam kuvet	Tes
Larutan kerja (dihangatkan pada 30°C/ 37°C selama 5 menit)	1,0 mL
Serum	50 μL

·                Pemeriksaan :

Campur homogen dan hangatkan pada 30°C/37°C selama 60 detik. Baca absorbansi setiap 60 detik selama 3 menit terhadap blanko air/udara λ 405 nm. Hitung nilai rata-rata dari selisih absorbansinya.

Faktor

2211

Perhitungan

ɣ-GT (IU/L) = (∆ abs / menit) x factor

Nilai Rujukan

	30°C	37°C
Pria Wanita	8-37 IU/L 6-24 IU/L	9-54 IU/L 8-35 IU/L